本实验室开展的特殊检查

1. ADAMTS13活性及抗体检测
1.1 ADAMTS13活性检测步骤
待测及对照血清室温透析3小时。
III型胶原包被96孔板并过夜。
BSA37℃封闭1小时。
加入稀释的透析及未透析血浆样品，37℃孵育1小时。
加入辣根酶标记兔抗人vWF多抗，37℃孵育半小时。
配置显色液进行显色，放入酶标仪检测(490nm)。
1.2 ADAMTS13抗体检测步骤
ADAMTS13蛋白纯品包被96孔板并过夜(分别设置抗原孔与非抗原孔)。
加入稀释的血浆样品及阳性对照样品，37℃孵育1小时。加入碱磷酶标记山羊抗鼠IgG，37℃孵育1小时。配置显色液进行显色，放入酶标仪检测(405nm)。




2. 血浆补体含量测定（C3, C4, CFB, CFH, CFI）
所有补体成分检测均要求冻融三次以内的EDTA抗凝血浆(取血后立即4度离心，分装保存)。
2.1 B因子检测步骤
使用商品化试剂盒
2.2 H因子检测步骤：
山羊抗人H因子多抗包被96孔板并过夜。
加入稀释的血浆样品及商品化H因子纯品(标准品)，37℃孵育1小时。
加入鼠抗人H因子单抗，37℃孵育1小时。
加入碱磷酶标记山羊抗鼠IgG，37℃孵育1小时。
配置显色液进行显色，放入酶标仪检测(405nm)。
2.3 I因子检测步骤
兔抗人I因子多抗包被96孔板并过夜。
加入稀释的血浆样品及商品化I因子纯品(标准品)，37℃孵育1小时。
加入鼠抗人I因子单抗，37℃孵育1小时。
加入碱磷酶标记山羊抗鼠IgG，37℃孵育1小时。
配置显色液进行显色，放入酶标仪检测(405nm)。




3. 细胞表面MCP测定
新鲜外周全血加入红细胞裂解液充分裂解。
离心后取白细胞并重悬。
取1×105个细胞，加入CD46抗体(FITC标记鼠抗人CD46)37℃半小时孵育。
上流式细胞仪检测。